Đầu thế kỷ 21, cậu bé Peter Parker sống với dì May và chú Ben sau một tai nạn máy bay làm cha mẹ cậu qua đời. Peter là một học sinh trung học sống hơi khép mình, thông minh và say mê nghiên cứu khoa học. Cậu chỉ có hai người bạn thân duy nhất là Mary Jane xinh đẹp và Harry Osborn, con trai của nhà công nghiệp giàu có Norman Osborn. Vô tình bị cắn bởi một con nhện biến đổi gen, Peter phát hiện ra mình có những khả năng siêu phàm của loài nhện.